Δοκιμή μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων (LTT)

Η δοκιμή μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων (LTT) αναπτύχθηκε στη δεκαετία του 1960 και χρησιμοποιείται κυρίως σε αλλεργιολογικές διαγνωστικές. Το τεστ LTT έχει επίσης χρησιμοποιηθεί για τη διάγνωση χρόνιων λοιμώξεων Borrelia burgdorferi, οι οποίες είναι η αιτία της νόσου του Lyme. Το τεστ είναι ιδιαίτερα σημαντικό όταν υπάρχουν δυσκολίες στη διάγνωση της νόσου. Τι είναι το τεστ LTT και πώς να ερμηνεύσετε τα αποτελέσματά του;

Πίνακας περιεχομένων:

1. Εφαρμογή δοκιμής μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων (LTT)
2. Δοκιμή μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων (LTT) - Borreliosis Lyme
3. Δοκιμή μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων (LTT) - τι είναι αυτό;
4. Δοκιμή μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων (LTT) - αποτελέσματα

Η δοκιμή μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων (LTT) περιγράφηκε για πρώτη φορά το 1960.

Το τεστ χρησιμοποιείται επί του παρόντος στην έρευνα και ως διαγνωστικό εργαλείο σε διάφορους τομείς της ιατρικής, κυρίως αλλεργιολογίας.

Εφαρμογή δοκιμής μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων (LTT)

Το τεστ LTT χρησιμοποιήθηκε σε:

• η εκτίμηση ελαττωμάτων στο ανοσοποιητικό σύστημα, π.χ. εκδηλώνεται από αυξημένη ευαισθησία σε λοιμώξεις
• διαγνωστικά χρόνιων βακτηριακών (Borrelia, Chlamydia, Yersinia), πρωτοζωικά (Giardia lamblia) και ιογενείς (ιούς έρπητα)
• διαγνωστικά υπερευαισθησίας τύπου IV (αλλεργία) που εξαρτώνται από Τ λεμφοκύτταρα σε φάρμακα, μέταλλα, πρόσθετα τροφίμων, καλούπια, τρόφιμα (π.χ. γλουτένη). Το τεστ LTT έχει χρησιμοποιηθεί ιδιαίτερα στην ανίχνευση αλλεργιών σε οδοντικά υλικά όπως οδοντοστοιχίες και γεμίσματα

Δοκιμή μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων (LTT) - Borreliosis Lyme

Οι διαγνωστικές δυσκολίες που σχετίζονται με τη διάγνωση της Lyme borreliosis αναγκάζουν τους ειδικούς να αναζητήσουν άλλες από τις συνιστώμενες εργαστηριακές εξετάσεις. Ένα από αυτά είναι το τεστ LTT. Πιστεύεται ότι το τεστ LTT μπορεί να είναι χρήσιμο σε:

• επιβεβαίωση της ενεργού λοίμωξης σε άτομα με θετικά ορολογικά αποτελέσματα, αλλά χωρίς συμπτώματα ενδεικτικά της νόσου του Lyme
• επιβεβαίωση της ενεργού λοίμωξης σε άτομα με αρνητικές ή οριακές ορολογικές εξετάσεις, αλλά με κλινικά συμπτώματα της νόσου του Lyme
• παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας της αντιβιοτικής θεραπείας
• αξιολόγηση της υποτροπής της Borreliosis Lyme

Ωστόσο, πρέπει να ληφθεί υπόψη ότι το τεστ LTT δεν συνιστά συνιστώμενο τεστ για τη διάγνωση της νόσου Lyme από το Εθνικό Επιμελητήριο Διαγνωστικών Εργαστηρίων, το Εθνικό Ινστιτούτο Δημόσιας Υγείας και τον Εθνικό Σύμβουλο στον τομέα των μολυσματικών ασθενειών, επειδή αυτή η δοκιμή εξακολουθεί να απαιτεί επικύρωση (δηλαδή επιβεβαίωση της αξιοπιστίας της) σε αυτήν την περίπτωση. η οντότητα της ασθένειας.

• Νόσος του Lyme - έρευνα για τη νόσο του Lyme. Έχει νόημα η δοκιμή τσιμπούρι;

Διαβάστε επίσης: Δοκιμή ELISA - τι εντοπίζει; Πώς να διαβάσετε τα αποτελέσματα; Η τιμή του τεστ Western Blot και της νόσου Lyme. Ερμηνεία των αποτελεσμάτων δοκιμών PCR (δοκιμή) - εφαρμογή. Τι είναι η τεχνική PCR;

Δοκιμή μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων (LTT) - τι είναι αυτό;

Η δοκιμή συνίσταται στην εκτίμηση της αντιδραστικότητας των κυττάρων του ανοσοποιητικού συστήματος (Τ κύτταρα της ανοσοποιητικής μνήμης) στο δοκιμαζόμενο αντιγόνο / αλλεργιογόνο, π.χ. ένα φάρμακο, μια βακτηριακή πρωτεΐνη. Τα ανοσοκύτταρα καθίστανται αντιδραστικά σε ένα δεδομένο αντιγόνο / αλλεργιογόνο μετά από προηγούμενη επαφή με αυτό (εξ ου και ο όρος Τ κύτταρα ανοσοποιητικής μνήμης).

Για τη δοκιμή LTT, τα κύτταρα λαμβάνονται από το περιφερικό αίμα του ασθενούς που λαμβάνεται από φλέβα. Στη συνέχεια, στο εργαστήριο, μεμονωμένα κλάσματα κυττάρων διαχωρίζονται από το αίμα, δηλαδή μονοπύρηνα κύτταρα (λεμφοκύτταρα και μονοκύτταρα).

Τα απομονωμένα κύτταρα στη συνέχεια αναπτύσσονται υπό κατάλληλες συνθήκες και στη συνέχεια διεγείρονται με το ειδικό αντιγόνο / αλλεργιογόνο. Εάν τα κύτταρα έχουν έρθει σε επαφή με αυτό, αρχίζουν να διαιρούνται και στη συνέχεια μετράται η ένταση αυτών των διαιρέσεων.

Οι μεμονωμένες τροποποιήσεις στη δοκιμή LTT μετρούν το τελικό σημείο της διαίρεσης των κυττάρων διαφορετικά και μπορούν να αξιολογηθούν έμμεσα μετρώντας:

• την παραγωγή μορίων σηματοδότησης όπως η ιντερφερόνη-γάμμα (INF-γ) που παράγονται με διαίρεση των κυττάρων · Ένα άλλο όνομα για αυτήν την τροποποίηση του τεστ LTT είναι το EliSpot
• δραστηριότητα υποδοχέα στην επιφάνεια διαχωριστικών κυττάρων, π.χ. CD25, CD69, HLA-DR
• η ποσότητα του DNA που σχηματίστηκε κατά τη φάση της σύνθεσης, η οποία βρίσκεται μόνο σε διεγερμένα με αντιγόνο / αλλεργιογόνα διαιρούμενα Τ κύτταρα. για το σκοπό αυτό, οι πρόσφατα συντεθειμένοι κλώνοι DNA επισημαίνονται π.χ. με 3Η-θυμιδίνη, η οποία στη συνέχεια ανιχνεύεται από έναν ειδικό μετρητή

Η δοκιμή πραγματοποιείται σε τρεις ή τέσσερις επαναλήψεις για να αυξηθεί η αξιοπιστία του ληφθέντος αποτελέσματος.

Αξίζει να γνωρίζετε

Το τεστ LTT είναι ένα πολύ απαιτητικό εργαστηριακό τεστ. Απαιτεί ακριβό και σύγχρονο εργαστηριακό εξοπλισμό και την εμπειρία του προσωπικού που εκτελεί τη δοκιμή.

Λόγω αυτού του γεγονότος, η δοκιμή πρέπει να πραγματοποιείται μόνο σε κέντρα που έχουν εμπειρία στην εκτέλεση της δοκιμής LTT.

Δοκιμή μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων (LTT) - αποτελέσματα

Ένα θετικό αποτέλεσμα της δοκιμής LTT δείχνει την παρουσία ανοσοποιητικής μνήμης Τ λεμφοκυττάρων στο αίμα που προηγουμένως είχε έρθει σε επαφή με το δοκιμαζόμενο αντιγόνο / αλλεργιογόνο. Αυτό μπορεί να υποδηλώνει αιτιώδη σχέση μεταξύ του μελετημένου παράγοντα και των συμπτωμάτων του ασθενούς

Το αποτέλεσμα της δοκιμής περιλαμβάνει αριθμητικές τιμές εκφρασμένες ως δείκτης διέγερσης (SI). Το SI εκφράζει την ένταση της κατανομής των ανοσοκυττάρων σε σχέση με τον αρνητικό έλεγχο, ο οποίος στην περίπτωση αυτή είναι ανοσοκύτταρα που δεν έχουν διεγερθεί με αντιγόνο / αλλεργιογόνο.

Μια βαθμολογία SI κάτω από 1 θεωρείται αρνητική, μια βαθμολογία μεταξύ 2 και 3 είναι ασθενώς θετική (οριακή) και μια βαθμολογία πάνω από 3 θεωρείται θετική.

Σπουδαίος

Ποιοι παράγοντες μπορούν να επηρεάσουν το αποτέλεσμα LTT;

Η λήψη φαρμάκων που καταστέλλουν τη δραστηριότητα του ανοσοποιητικού συστήματος, π.χ. στεροειδή (μεθοτρεξάτη, πρεδνιζόνη) μπορεί να μειώσει την ικανότητα των κυττάρων να διαιρούνται σε κυτταρική καλλιέργεια ή / και την παραγωγή κυτοκινών από τα κύτταρα.

Βιβλιογραφία

1. https://www.xenodiagnostics.com/lymphocyte-transformation-test.html
2. Pichler W.J και Tilch J. Η δοκιμή μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων στη διάγνωση της υπερευαισθησίας του φαρμάκου. Αλλεργία. 2004 Αυγ. 59 (8): 809-20.
3. Rychlik U. et αϊ. Εργαστηριακές διαγνωστικές δοκιμές μετασχηματισμού λεμφοκυττάρων (LTT). Journal of Laboratory Diagnostics 2013, 49 (4); 425-428.
4. Εργαστηριακή διάγνωση ασθενειών που μεταδίδονται με κρότωνες Συστάσεις της Ομάδας Εργασίας: Εθνικό Επιμελητήριο Διαγνωστικών Εργαστηρίων, Εθνικό Ινστιτούτο Δημόσιας Υγείας-Εθνικό Ινστιτούτο Υγιεινής, Εθνικός Σύμβουλος στον τομέα των μολυσματικών ασθενειών, Τμήμα Λοιμωδών Νοσημάτων και Νευρολογικών Λοιμώξεων, Ιατρικό Πανεπιστήμιο Białystok, Πολωνική Εταιρεία ιολογίας, Βαρσοβία 2014.

Karolina Karabin, MD, PhD, μοριακός βιολόγος, διαγνωστικός εργαστηρίου, Cambridge Diagnostics Polska. Βιολόγος με εξειδίκευση στη μικροβιολογία και εργαστηριακός διαγνωστής με εμπειρία άνω των 10 ετών σε εργαστηριακές εργασίες. Απόφοιτος του Κολλεγίου Μοριακής Ιατρικής και μέλος της Πολωνικής Εταιρείας Ανθρώπινης Γενετικής. Επικεφαλής ερευνητικών επιχορηγήσεων στο Εργαστήριο Μοριακών Διαγνωστικών στο Τμήμα Αιματολογίας, Ογκολογίας και Εσωτερικών Νοσημάτων του Ιατρικού Πανεπιστημίου της Βαρσοβίας. Υπερασπίστηκε τον τίτλο του γιατρού των ιατρικών επιστημών στον τομέα της ιατρικής βιολογίας στην 1η Σχολή Ιατρικής του Ιατρικού Πανεπιστημίου της Βαρσοβίας. Συγγραφέας πολλών επιστημονικών και δημοφιλών επιστημονικών έργων στον τομέα της εργαστηριακής διάγνωσης, της μοριακής βιολογίας και της διατροφής. Σε καθημερινή βάση, ως ειδικός στον τομέα της εργαστηριακής διάγνωσης, διευθύνει το ουσιαστικό τμήμα στο Cambridge Diagnostics Polska και συνεργάζεται με μια ομάδα διαιτολόγων στο CD Dietary Clinic. Μοιράζεται τις πρακτικές του γνώσεις σχετικά με τη διαγνωστική και τη διατροφική θεραπεία ασθενειών με ειδικούς σε συνέδρια, σεμινάρια και σε περιοδικά και ιστότοπους. Ενδιαφέρεται ιδιαίτερα για την επίδραση του σύγχρονου τρόπου ζωής στις μοριακές διαδικασίες στο σώμα.